奶与奶制品中嗜冷假单胞菌的计数

2009年,iso发布了iso/ts 11059:2009,对奶与奶制品中嗜冷假单胞菌的计数方法进行了描述,通过该方法,能够对产色素和不产色素的嗜冷假单胞菌进行分离。该标准也适合乳业的环境样本。
乳业在我国发展迅速,而且品种丰富,包括液体奶(包括巴氏杀菌奶,超高温奶)、酸乳、冰淇淋、果汁果味乳、雪糕、酸乳饮料、麦乳精等。其中液体奶
占主要部分,巴氏杀菌奶又占液体奶的主要部分。在巴氏杀菌奶中,常常有低温菌的存在。低温菌即嗜冷菌,能在7℃以下繁殖。当冰箱中贮存的奶超过保存期,就会造成低温菌的大量繁殖,引起产品变质。乳被低温菌污染被认为是影响奶保质期的最为关键的因素。也就是说,耐冷假单胞菌被认为是巴氏杀菌奶最为重要的菌。
iso/ts 11059:2009即是对耐冷假单胞菌的检测和计数。其中分离假单胞菌的培养基推荐的是ppa平板,在25℃孵育48h,然后计数。保留菌落总数在150以下的平板,挑取5个菌落进行纯培养和验证试验。
验证试验包括氧化酶试验和葡萄糖发酵试验。氧化酶试验可使用氧化酶反应试纸,加样后如为阳性,则在5秒至30秒内试纸变为紫红色。葡萄糖发酵试验可使用葡萄糖琼脂,himedia货号是m1589,配方和iso完全一致。假单胞菌为氧化酶试验阳性,葡萄糖发酵阴性。不过iso也指出,某些假单胞菌菌株也可能在琼脂表面产生黄色。
ppa培养基也可从himedia购买,货号为m1788,品名为penicillin and pimaricin pseudomonas agar base,配合两个添加剂(货号fd 264和fd 265) 一起使用。假单胞菌如需进一步鉴定到种,可使用非发酵菌生化鉴定试剂盒(himedia货号kb019),该试剂盒包含24种生化反应,可鉴定的假单胞菌有19种。
himedia的假单胞菌显色培养基和假单胞菌分离琼脂同样值得注意。前者品名为hifluoro pseudomonas hiveg agar base,货号是mv1469。该培养基含有特异性荧光剂,铜绿假单胞菌裂解荧光剂,从而紫外灯下发出荧光(下图左面)。后者(货号为m406)含有三氯生,一种广谱抗菌剂,但假单胞菌对其耐受,可以生长。
himedia公司是国际知名微生物产品生产商,一直致力于微生物培养基和细胞培养基的研发和生产,具有who gmp认证、iso9001:2008,iso13485:2003认证,ce认证和fda注册登记。其产品行销全球140多个国家。
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