技术发展历史生物安全柜
、年k最早提出核酸体外扩增的设想
、年m等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应,使用的dna聚合酶是k片段,因为这个发现, m获得了年诺贝尔化学奖
、年初k改用t dna聚合酶进行pcr
、年s发现t dna聚合酶,从此pcr技术得以广泛应用
、年h首创原位pcr反应
、年h提出pcr技术
、年第三代pcr
之父 k m
反应基本原理
、变性
、退火
、延伸
、第二次循环
、第三次循环
反应过程
变性将被复制的dna片段在高于其t的条件下（~℃）加热，使dna双螺旋结构的氢键断裂二解螺旋，形成两条单链分子作为扩增反应的模板，以便与引物结合
退火将反应体系的温度降至寡核苷酸（引物）的熔点温度以下（~℃），以便使引物能与模板dna序列互补结合，形成杂交链
延伸将反应体系的温度升至℃左右，此时反应体系按照模板链的序列以碱基互补配对原则以此把ntp加至引物的端，在t dna聚合酶的存在下，杂交链不断延伸，直至形成新的dna双链