血清是在三维细胞培养过程中常会被用到的东西,对于科研新手来说,很多人都容易忘记操作步骤,或者是不知道在实验过程中应该注意哪些问题,从而导致实验失败。通过今天这篇文章,小编就为大家介绍一下在进行细胞培养时,如何避免血清中沉淀物的产生,一起来看一下吧。
想要避免在三维细胞培养过程中所使用的血清发生沉淀,首先应该用正确的方法解冻血清。在解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温)进行解冻,若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。因此为了防止沉淀产生,可以在解冻过程中将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。血清不宜置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。有些科研人员在三维细胞培养过程中会想要做热灭活,由于血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,因此若非必要,可以无须做此步骤。若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高、时间过久或摇晃不均匀,都会造成血清中沉淀物增多。
除了保证血清的质量以外,在三维细胞培养实验中,学会合理使用细胞培养添加剂也是很有必要的。大部分添加物和试剂最多可以冻融3次,如果次数更多都会在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀,将会影响它的性能。贮存在4℃冰箱中的液体胰蛋白酶溶液只能使用一周,因为胰蛋白酶在4℃就可能开始降解,如果在室温下放置超过30分钟,就会变得不稳定。
只要掌握上文所介绍的要点,想要避免实验过程中血清内产生沉淀物还是比较容易的。目前国内很多实验室对三维细胞培养的研究还处于起步阶段,如果您也想了解更多有关三维细胞培养的知识,小编推荐您可以向康宁公司的科研团队学习。