大鼠谷氨酸含量检测试剂盒【glu-elisa试剂盒】
实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被大鼠谷氨酸（glu）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠谷氨酸（glu）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（od 值），计算样品浓度。
操作步骤
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl； 样本孔中加入待测样本50μl；空白孔不加。 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μl），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。 每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。 每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。
实验结果计算
以所测标准品的od值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的od值代入方程，计算出样品的浓度。
试剂盒性能
检测范围：1.5 mg/l – 48 mg/l。 灵敏度：最低检测浓度小于0.1 mg/l。 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。
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